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專用血清能夠幫助達(dá)到省時(shí)省力的目的
點(diǎn)擊次數(shù)：1671 更新時(shí)間：2022-04-26
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，若血清選擇不當(dāng)不僅會造成試驗(yàn)的失敗，而且造成的人力、物力和財(cái)力的損失，特別是對異地珍惜動物品種，更是難以想象。但是，目前市場上血清種類繁多，質(zhì)量參差不齊。因此研究不同種類的血清對細(xì)胞培養(yǎng)的影響具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。目的就是追求高效率、低成本，通過對比試驗(yàn)在短時(shí)間內(nèi)找到培養(yǎng)細(xì)胞的血清，從而達(dá)到省時(shí)、省力、省資源的目的。
專用血清中含有豐富的細(xì)胞生長必需的營養(yǎng)成分，血清在體外可以再造適于細(xì)胞生長、繁殖、黏附和分化的生理環(huán)境，是組織細(xì)胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基，在動物細(xì)胞生長培養(yǎng)中起著十分重要的作用。血清中的主要成分為蛋白質(zhì)、多肽、激素等，那些被發(fā)現(xiàn)有作用的蛋白質(zhì)，主要為白蛋白和球蛋白。
血液凝固析出的淡黃色透明液體，如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。其周圍所析出之淡黃色透明液體即為專用血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原，這一點(diǎn)是與血漿的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中，血小板釋放出許多物質(zhì)，各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，如凝血酶原變成凝血酶，并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾，血液中許多化學(xué)成分的分析，都以血清為樣品。
正常專用血清，來源于非免疫的大鼠宿主，經(jīng)過脂質(zhì)萃取PBS溶液透析，改善其透明度。推薦用PBS將封閉血清原液稀釋5-20倍，配成5%-20%的工作液，直接滴加在組織切片或者細(xì)胞涂片上，37℃度孵育10-30分鐘，清除血清，勿洗，滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗工作液，37℃孵育1-2h或4℃過夜。注意：封閉用血清中不能含有目標(biāo)蛋白，且與一抗來源不同，可用與二抗相同來源的封閉血清。
